旋毛虫Ts87抗原基因在毕赤酵母中的构建及表达

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：caomao8000

【摘要】

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目的构建旋毛虫Ts87抗原基因并在毕赤酵母中分泌表达.方法通过PCR特异性扩增Ts87抗原基因,构建重组质粒PPICZαA-Ts87.其线性化后,转化毕赤酵母GS115,抗生素Zeocin 筛选高抗

【作者】

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王少华诸欣平顾园杨雅平杨静

【机构】

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首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室

【出处】

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志

【发表日期】

：

2005年4期

【关键词】

：

旋毛虫蠕虫基因毕赤酵母菌基因表达 Trichinella spiralis Helminth genes Pichia pastoris Gene e

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目的构建旋毛虫Ts87抗原基因并在毕赤酵母中分泌表达.方法通过PCR特异性扩增Ts87抗原基因,构建重组质粒PPICZαA-Ts87.其线性化后,转化毕赤酵母GS115,抗生素Zeocin 筛选高抗性转化子,PCR筛选阳性重组菌株.表型鉴定后进行甲醇诱导表达,收集培养不同天数的上清液.斑点杂交法分析上清液以确定有无重组蛋白分泌表达.十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blotting)分析鉴定表达蛋白.结果与结论成功构建了PPICZαA-Ts87毕赤酵

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