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MicroRNAs(miRNAs)是一类长约22nt的内源RNA,通过抑制和破坏RNA的方式对动植物体内的基因表达起重要调节作用,其相关方面的研究已成为热点。针对miRNA巧妙设计茎环引物(Stem-loop Primer),经过反转录、PCR扩增两个步骤,可使实时荧光定量PCR技术(RT-qRCR)用于miRNA的定量检测,简称SLP-RT-qPCR技术。这种茎环引物定量检测技术有特异性强、灵敏度高、可检测范围广和定量准确等特点。另外,最近开发的多重定量法可以同时对样品中多种miRNA进行定量。以上诸多优势,使之对miRNA的研究起到了有力的推动作用。本文系统介绍了该技术自建立近十年来在引物设计、多重定量、荧光标记等方面的发展及其应用情况,对其原理及关键技术进行综述,以期对miRNA的定量检测的应用和发展有所帮助。