建立了一种可快速检测配方羊奶粉中牛β-乳球蛋白（β-lactoglobulin,β-lg）的胶体金免疫层析检测方法。通过杂交瘤技术制备β-lg单克隆抗体（monoclonal antibody,mAb）,半抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC₅₀)为5.87μg/mL。将胶体金标记的β-lg mAb包被于金标垫,β-lg和山羊抗小鼠IgG标记于硝酸纤维素膜（nitrocellulose membrane,NC膜）分别作为检测线（T线）和质控线（C线）,开发了可检测β-lg的免疫层析试纸条。该试纸条对β-lg的检测限（limit of detection,LOD）值为50μg/mL,与其他基质成分均未产生有效交叉反应,对全脂山羊乳粉中掺杂脱脂牛奶粉（nonfat skim milk,NFSM）、脱盐乳清粉（desalted whey powder,DWP）和乳清蛋白粉（whey protein powder,WPP）的LOD值分别为5%、5%和0.1%。运用该方法对9个市售配方羊奶粉进行分析,检测结果与商品化酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）试剂盒一致。该方法前处理快速简单,5 min即可裸眼判定结果,可用于配方羊奶粉商品的现场快速检测。