检测β-连环蛋白(β-catenin)在兔下颌骨牵引区新生骨组织中的表达,探讨β-catenin在牵引成骨新骨形成中的作用。
方法将26只新西兰大白兔采用随机数字表法分为3组:正常对照组(A组)2只、下颌骨缺损对照组(B组)12只、下颌骨牵引组(C组)12只。A组2只兔不行手术,其下颌骨作为正常对照;B组于第1磨牙和颏孔间作下颌骨垂直截骨后随即牵开5 mm,用钛板、钛钉坚强内固定;C组作相同截骨后,断端复位,放置牵引器固定,术后第4天开始以0.8 mm/d的速度连续牵引7 d,然后进入固定期。B、C组分别于第6、10、17、24、31、38天处死2只兔,切取牵引区新生骨痂行蛋白质印迹法和免疫组织化学方法检测β-catenin的分布及表达情况,并做图像分析。测量结果通过SPSS 22.0统计软件利用斯皮尔曼等级相关系数进行数据分析,r>0.75,P<0.05为差异有统计学意义。
结果蛋白质印迹法检测结果显示,牵引期(术后6~10 d)β-catenin的表达水平增高,在牵引末期(术后10 d)达到顶峰,进入固定期后β-catenin的表达水平逐渐下降。各时期C组β-catenin的表达水平较B组高。免疫组织化学染色显示,β-catenin主要在骨痂组织的炎细胞(如单核细胞)、成纤维细胞及少量沿牵张方向排列的新生成骨细胞、骨细胞和骨周围结缔组织中表达,胞浆和胞核染色呈阳性。C组在牵引开始后(术后第6天)β-catenin的表达强烈(3.245 8±0.132 3),在第10天达高峰(4.602 8±0.021 9)。随着牵引张力的消失,术后第17天开始,β-catenin表达逐渐降低(3.639 8±0.125 5),但染色仍为阳性。B组在术后第6天β-catenin染色强阳性(2.734 0±0.134 7),术后第10天最为强烈(3.101 3±0.104 8),术后第17天表达为2.542 8±0.211 1,较术后第10天减弱。各时间点牵引组β-catenin表达高于下颌骨缺损对照组,差异有统计学意义(r=0.943,P=0.005 6)。
结论在下颌骨牵引成骨过程中,牵张应力使β-catenin表达增强,提示β-catenin在从机械信号向化学信号转化中起重要作用,参与了牵引成骨中新骨形成的调节。