【摘 要】
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目的：构建原核表达载体pET-28a（＋）-hISO,探讨其融合蛋白在大肠杆菌中的稳定表达情况,为后续实验研究奠定基础。方法：以Caco-2细胞的总RNA为模版,采用RT-PCR方法扩增出大小为1 770b
【机 构】
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遵义医学院珠海校区生物化学教研室,遵义医学院生物化学教研室
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目的：构建原核表达载体pET-28a（＋）-hISO,探讨其融合蛋白在大肠杆菌中的稳定表达情况,为后续实验研究奠定基础。方法：以Caco-2细胞的总RNA为模版,采用RT-PCR方法扩增出大小为1 770bp的人异麦芽糖酶（hISO）基因片段,将其插入到pET-28a（＋）中,构建重组载体pET-28a（＋）-hISO。经PCR、酶切及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达,亲和层析纯化重组蛋白,利用SDS-PAGE电泳、Western blotting对重组蛋白进行分析和鉴定。结果
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