高效液相色谱法测定牛初乳中IgG含量的方法研究

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采用高效液相色谱法对牛初乳中IgG含量进行测定,并与琼脂双扩散法进行比较,筛选出一种快速、精确测定IgG含量的方法。在牧场(非热应激条件,平均温度-10℃)随机选取7头体况良好、体重、胎次、产奶量及分娩日期都相近的黑白花奶牛作为试验研究对象。分别在母牛分娩后不同时间内收集乳样,用液氮冷冻,然后于-70℃的冰柜中保存,分析测定时再进行解冻,分别用琼脂双扩散法和高效液相色谱法测定牛初乳中IgG效价和含量。结果表明:①选用反相键合色谱柱ZORBAX300SB—C18,流动相0.02mol/lPBS(pH值6.8)与乙腈的比例为95%:5%时,初乳各成分分离效果达到最佳;②选择流速为0.2ml/min时,初乳蛋白组分得到有效分离。与琼脂双扩散法相比,高效液相色谱法测定牛初乳中IgG含量具有分析速度快、灵敏度和精确度高、分离效果好、回收率高等优点。
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