重组人抑癌相关蛋白核苷二磷酸激酶A的原核表达

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shuyun99a55

【摘要】

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目的:为提高表达量,简化纯化工艺,获得可用于临床研究的重组人NDPK-A蛋白,构建带有6×His纯化标签的原核表达载体,优化表达条件获得产物高表达并鉴定产物活性.方法:将抑

【作者】

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冉延超王一飞熊盛张美英黄文韬罗林波刘秋英

【机构】

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广州暨南大学生物医药基地

【出处】

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中国病理生理杂志

【发表日期】

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2004年6期

【关键词】

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核苷二磷酸激酶肿瘤抑制蛋白质类 Nucleoside-diphosphate kinase Tumor suppressor proteins

【基金项目】

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国家自然科学基金，广东省科技厅科研项目，广东省广州市科技局科研项目，暨南大学校科研和教改项目

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目的:为提高表达量,简化纯化工艺,获得可用于临床研究的重组人NDPK-A蛋白,构建带有6×His纯化标签的原核表达载体,优化表达条件获得产物高表达并鉴定产物活性.方法:将抑癌基因nm23-HI从质粒pBVNMH1中亚克隆于带有纯化标签的表达载体pQE40中;梯度变化表达条件获得产物高表达;镍离子螯合层析柱纯化目的蛋白;Western blot鉴定产物的免疫原性;HPLC测定产物的激酶活性;鸡胚尿囊膜试验鉴定产物抑制血管新生的生物活性.结果:pQE-40中亚克隆的nm23-HI序列无误;目的蛋白最

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