【摘 要】
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目的 :建立一种实时荧光定量聚合酶链反应 (real-timefluorescencequantitativePCR ,FQPCR)方法 ,准确快速的定量检测唾液中的远缘链球菌。方法 :在定性PCR检测的基础上设计
【机 构】
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第四军医大学口腔医学院,中山医科大学达安基因诊断中心
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目的 :建立一种实时荧光定量聚合酶链反应 (real-timefluorescencequantitativePCR ,FQPCR)方法 ,准确快速的定量检测唾液中的远缘链球菌。方法 :在定性PCR检测的基础上设计一对特异引物 ,以及一条TaqMan标记的寡核苷酸探针 ,对已知数量的标准远缘链球菌株 6 715以及 30名临床龋病儿童唾液样本核酸模板进行PCR扩增 ,并用培养鉴定的方法对 30例唾液样本进行对照检测。结果 :经FQPCR检测 ,10 6～ 10 2 拷贝的标准菌模板均可以用该方法检出 ,且循环阈值 (Ct值 )与起始拷贝数的对数相关性好 ,r=- 0 .9996 0 9。 30例唾液样本中 ,13例可以检出并准确定量 ,培养鉴定的方法结果有 11例阳性。结论 :实时荧光定量PCR方法可以用于快速灵敏的定量检测远缘链球菌 ,比传统的培养鉴定方法显示了更大的优越性。
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