【摘 要】
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研究60％乙醇提取的马尾松花粉多糖组分D(PPM60-D)及其硫酸酯化物(SPPM60-D)对小鼠脾脏B淋巴细胞增殖、细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)及抗体生成的影响.水煮醇沉法提取得到粗
【机 构】
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山东省动物抗性生物学重点实验室,山东师范大学生命科学学院济南250014
【出 处】
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第十三届全国花粉资源开发与利用研讨会
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研究60％乙醇提取的马尾松花粉多糖组分D(PPM60-D)及其硫酸酯化物(SPPM60-D)对小鼠脾脏B淋巴细胞增殖、细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)及抗体生成的影响.水煮醇沉法提取得到粗多糖,乙醇分级沉淀得60％乙醇沉淀多糖PPM60,Sephacryl S-400HR分离纯化得多糖组分D,用氟磺酸—吡啶法对组分D进行硫酸酯化,尼龙毛法分离B淋巴细胞,MTT法测定其增殖,荧光分光光度计测定B淋巴细胞[Ca2+]I,溶血空斑实验(PFC)和定量溶血分光光度(QHS)法测定B细胞抗体生成情况.结果SPPM60-D相对于PPM60-D能更显著地提高B淋巴细胞的增殖以及[Ca2+]i(P＜0.01);经TAK-242、LY294002、U73122、低分子肝素、维拉帕米和2-APB抑制剂作用后,均可抑制SPPM60-D和PPM60-D所致的[Ca2+]i的升高(P＜0.05或P＜0.01);PFC和QHS检测证实,SPPM60-D对于促进B淋巴细胞的分化及抗体的生成有显著作用,而PPM60-D的作用较弱(P＜0.01).以上研究表明,PPM60-D经过硫酸酯化改性后,活性明显提高,推测SPPM60-D可与B淋巴细胞上TOLL样受体4(TLR4)结合,通过TLR4-PI3K-PLC-IP3R信号通路使钙库释放激活的钙通道(CRAC)打开,从而使[Ca2+]i升高来激活B淋巴细胞,进而提高其体外增殖和抗体生成能力.
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