北戴河近岸沉积物中微生物16SrDNA的PCR—RFLP分析

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采用间接法提取了北戴河地区近岸沉积物中微生物的总DNA,以细菌的通用引物27F和1492R扩增16SrDNA片段,将扩增产物克隆到T-载体上,并转化大肠杆菌感受态细胞,构建沉积物中细菌16SrDNA克隆文库。PCR扩增基因文库中插入的16SrDNA外源片段,用两种限制性内切酶HhaⅠ和RsaⅠ分别酶切,获得该海洋沉积物131个克隆的酶切指纹图谱。结果表明:HhaⅠ和RsaⅠ联合酶切产生了41个基因分型,文库的覆盖度达74.81%,HhaⅠ和RsaⅠ单酶切产生的基因分型分别为30和22,但文库的覆盖度高;克
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