目的分析外周血表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）基因T790M突变的晚期肺腺癌患者后线应用奥希替尼治疗耐药后的基因突变情况,探讨可能的耐药机制。方法晚期肺腺癌患者52例,均给予奥希替尼后线治疗,并于入院次日清晨采集外周血,提取循环肿瘤DNA,采用微滴数字PCR法检测EGFR基因T790M突变情况。对外周血检出EGFR基因T790M突变者,至病情进展时再次采集外周血,采用高通量测序进行实体瘤常见突变基因检测。结果 52例患者中36例检出外周血EGFR基因T790M突变。36例患者奥希替尼耐药后再次检测,发现10例T790M突变丢失;26例T790M突变保留,其中24例新发C797S突变;4例检出EGFR基因L718Q、L718V和L792F突变;29例检出旁路基因突变,其中MET基因突变21例（8例MET基因扩增,12例单核苷酸位点变异,1例多MET基因位点突变）,12例ERBB2基因突变,7例BRAF基因突变,3例KRAS/NRAS基因突变,5例PIK3CA基因突变,1例PTEN基因突变,1例NF1基因突变,17例检出2种及以上旁路基因突变,18例同时存在EGFR基因继发突变和旁路基因突变。结论获得性C797S突变是T790M突变保留肺腺癌患者奥希替尼耐药的主要机制,MET基因突变是T790M突变丢失肺腺癌患者奥希替尼耐药的主要机制。