【摘 要】
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目的 探讨肠道病毒71型(EV71)编码的3C蛋白酶对于肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)的切割作用.方法 采用Western blot的方法检测EV71感染对于TRAF3蛋白表达的影响.体外转染TRAF3和3C蛋白,通过Western blot检测3C对于TRAF3蛋白的影响.通过构建3C突变体,检测其蛋白酶活性对于切割的影响.通过免疫共沉淀检测3C对于TRAF3和TRIF相互作用 的影响
【机 构】
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100730北京北京协和医学院/中国医学科学院病原生物学研究所,100730北京北京协和医学院/中国医学科学院病原生物学研究所,100730北京北京协和医学院/中国医学科学院病原生物学研究所,1007
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目的 探讨肠道病毒71型(EV71)编码的3C蛋白酶对于肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)的切割作用.方法 采用Western blot的方法检测EV71感染对于TRAF3蛋白表达的影响.体外转染TRAF3和3C蛋白,通过Western blot检测3C对于TRAF3蛋白的影响.通过构建3C突变体,检测其蛋白酶活性对于切割的影响.通过免疫共沉淀检测3C对于TRAF3和TRIF相互作用 的影响.结果 EV71感染细胞后可引起TRAF3蛋白的减少,其3C蛋白酶可以引起TRAF3的切割,蛋白酶活性位点突变后则不引起TRAF3的切割.位点突变试验显示TRAF3的Q242位突变后则不能被3C切割,且3C可以减少TRAF3与TRIF的结合.结论 EV71 3C蛋白酶可通过切割TRAF3机制在天然免疫逃逸中发挥作用。
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