蜜蜂遗传多样性研究的RAPD-PCR反应体系的正交优化

来源 :吉林畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yigeyige
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利用正交设计L16(45)对蜜蜂基因组DNARAPD-PCR反应体系的5个因素(Tag酶,引物,Mg2+,dNTP,模板)在4个水平上进行优化试验,筛选出各个反应因素的最佳水平,建立蜜蜂模板DNARAPD-PCR反应的最佳体系(25L):10×PCRbuffer3.0L,Tag酶0.5U,引物浓度0.4mol/L,Mg2+浓度3.0mmol/L,dNTP浓度0.5mmol/L,模板40ng。对蜜蜂DNARAPD-PCR最佳反应体系的退火温度进行了梯度试验,最佳退火温度为54℃。
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