人肝再生增强子原核表达系统的构建与筛选

来源 :浙江预防医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：effielove0228

【摘要】

：

目的构建多个人肝再生增强子（hALR）的原核表达系统进行原核表达、鉴定及筛选，得出理想的系统用于进一步的研究。方法构建4个重组表达质粒pET28a（＋）／hALR、pET23a／hALR、pGEX-5x-1／hALR

【作者】

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俞海英刘骏李君盛吉芳

【机构】

：

浙江大学医学院附属第一医院

【出处】

：

浙江预防医学

【发表日期】

：

2007年3期

【关键词】

：

人肝再生增强子原核表达系统筛选 Human augmenter of liver regeneration Prokaryotie expression

【基金项目】

：

国家863计划（2003AA205150）、国家自然科学基金（30170255）、浙江省“新世纪151人才工程”、浙江省自然科学基金（Y204156）.

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目的构建多个人肝再生增强子（hALR）的原核表达系统进行原核表达、鉴定及筛选，得出理想的系统用于进一步的研究。方法构建4个重组表达质粒pET28a（＋）／hALR、pET23a／hALR、pGEX-5x-1／hALR、pGEX-5x-2／hALR，分别转化3种宿主菌，诱导表达重组hALR蛋白，用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting鉴定重组蛋白。结果双酶切和DNA测序证实hALR cDNA正确插入4种表达载体并成功转化宿主菌，仅pET28a（＋）／hALR的BL21（DE3）菌株成功

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