结核分枝杆菌Ag85A基因DNA疫苗的构建和免疫原性研究

来源 :西安交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:cyuaxl
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目的构建编码结核分枝杆菌蛋白Ag85A基因为基础的DNA疫苗.方法采用聚合酶链反应从结核杆菌H37Rv株基因组中,扩增出分泌蛋白Ag85A成熟蛋白的编码基因,用限制性内切酶消化后,插入克隆载体pGEM-T Easy中.经酶切鉴定与序列测定证实后,以亚克隆法构建于真核表达载体pcDNA3.1的相应酶切位点.重组质粒肌注免疫小鼠,4周后用ELISA法检测抗体滴度.结果结核分枝杆菌H37Rv株Ag85A成熟蛋白的编码基因经序列测定证实无突变;经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切鉴定证实克隆基因正确插入载体pcDNA3
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