探讨CD137-CD137L信号通路是否通过活化T细胞核因子c1(NFATc1)促进动脉粥样硬化斑块内血管新生。
方法将载脂蛋白E基因敲除小鼠分为3组，即对照组、CD137刺激组和CD137抑制组，每组均为5只小鼠，采用免疫组织化学法检测小鼠主动脉斑块内的CD31含量。将小鼠内皮细胞(bEnd.3)分为4组，即空白对照组、IgG同型对照组、CD137刺激组和CD137抑制组，采用Western blot检测内皮细胞的NFATc1总蛋白和核蛋白水平。采用流式细胞术检测内皮细胞膜表面的CD137蛋白表达水平。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测内皮细胞裂解液中的CD137蛋白水平。采用Transwell迁移实验检测内皮细胞的迁移能力。将内皮细胞分为5组，即对照组、CD137刺激组、沉默NFATc1细胞株+CD137刺激组、CD137抑制组和过表达NFATc1细胞株+CD137抑制组，检测各组内皮细胞的管腔形成能力。
结果(1)CD137刺激组的斑块内CD31表达水平高于对照组(1 191±187比115± 30，P<0.05)；CD137抑制组的斑块内CD31表达水平(450±92)低于CD137刺激组(P<0.05)。(2)CD137刺激组内皮细胞内的NFATc1总蛋白(2.18±0.30比1.00±0.00，P<0.05)和核蛋白(3.07±0.03比1.00±0.00，P<0.05)水平均高于IgG同型对照组；CD137抑制组内皮细胞内的NFATc1总蛋白(0.84 ± 0.09)和核蛋白(0.82±0.04)水平均低于CD137刺激组(P均<0.05)。(3)流式细胞术显示，肿瘤坏死因子-α刺激后内皮细胞的CD137荧光强度高于正常内皮细胞(5 163±329比1 660±162，P<0.05)。(4)ELISA显示，肿瘤坏死因子-α刺激后内皮细胞裂解液中的CD137蛋白水平高于正常内皮细胞[(573.4±23.7)pg/mg比(69.5±16.7)pg/mg，P<0.05]。(5)CD137刺激组的内皮细胞迁移数量多于IgG同型对照组(1.19±0.13比1.00±0.00，P<0.05)；CD137抑制组的内皮细胞迁移数量(0.82±0.06)少于CD137刺激组(P<0.05)。(6)内皮细胞管腔形成实验显示，CD137刺激组的内皮细胞小管长度[(5.76±0.18)mm比(4.21±0.11)mm，P<0.05]大于对照组，分支数量[(29.38 ± 1.28)个比(21.13 ± 0.96)个，P<0.05]多于对照组；沉默NFATc1细胞株+CD137刺激组的内皮细胞小管长度[(1.90±0.11)mm]小于CD137刺激组，分支数量[(8.91 ± 0.72)个]少于CD137刺激组(P均<0.05)；CD137抑制组的内皮细胞小管长度[(1.28±0.34)mm]小于CD137刺激组，分支数量[(5.07 ± 0.35)个]少于CD137刺激组(P均<0.05)；过表达NFATc1细胞株+CD137抑制组的内皮细胞小管长度[(4.82±0.09)mm]大于CD137抑制组，分支数量[(24.44±1.05)个]多于CD137抑制组(P均<0.05)。
结论CD137-CD137L信号通路可能通过NFATc1促进小鼠动脉粥样硬化斑块内的血管新生。