【摘 要】
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目的：旨在克隆人肥胖（obese,ob）基因的全长cDNA序列,与EGFP重组构建融合蛋白表达载体,并分析其亚细胞水平的定位。方法：提取人脂肪细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增出人ob基因cDNA,
【基金项目】
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国家“863”高技术研究发展计划项目（2007AA100504）, 江苏省高校自然科学重大基础研究项目（08KJA230001）资助
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目的：旨在克隆人肥胖（obese,ob）基因的全长cDNA序列,与EGFP重组构建融合蛋白表达载体,并分析其亚细胞水平的定位。方法：提取人脂肪细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增出人ob基因cDNA,并克隆至真核表达载体pEGFP-C1,重组质粒转染NIH-3T3细胞,荧光显微镜分析EGFP-ob融合蛋白的亚细胞定位。结果：克隆的ob基因cDNA为501bp,共编码167个氨基酸,与GenBank公布的人ob基因序列一致,荧光显微镜分析表明,重组的EGFP-ob融合蛋白主要分布于NIT-3T3的细胞质中
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