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摘 要：本实验研究依托红霉素片的制备方法并对其溶出因素进行考察。方法：采用安捷伦十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm），0.05mol/L磷酸氢二钾（用20%磷酸调节pH至8.2）-乙腈（40∶60），检测波长为202nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。对依托红霉素在40～160μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。结论：测定方法简便、准确；本制剂稳定、可靠。
关键词：依托红霉素片；工艺；优化
依托红霉素中文别名红霉素丙酸脂十二烷基硫酸盐、红霉素硫酸月桂酸酯、无味红霉素干糖浆等。依托红霉素为红霉素丙酸酯的十二烷基硫酸盐，口服后在胃肠中分解为红霉素丙酯，部分在血液中水解成游离的红霉素。本实验研究依托红霉素片的制备方法并对其溶出因素进行考察。
1仪器与试药
1.1仪器：HLSH2—6型湿法混合制粒机（北京航空制造工程研究所）；78X-Z型片剂四用测定仪（上海黄海药检仪器厂）；HWP-5实验室蒸馏水器（郑州泽铭科技有限公司）；GFG80 120高效沸腾干燥机（广州兴荣机械有限公司）；FA1004A电子天平（成都市科恒达仪器设备有限责任公司）；双频数控加热超声波清洗器（上海汗诺仪器有限公司）；旋转式压片机（上海天祺制药机械有限公司）；LC-5520型高效液相色谱仪（陕西华信仪器设备有限公司）；US6180DH数显型超声波清洗器（北京优晟联合科技有限公司）。
1.2色谱柱：安捷伦 十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm）。
1.3对照品：对依托红霉素 购自中国药品生物制品检定所。
1.4试剂：磷酸二氢钾（上海江莱生物科技有限公司）、磷酸（上海江莱生物科技有限公司）、三乙胺（武汉强松精细化学品有限公司）、乙腈（上海江莱生物科技有限公司）、甲醇（上海江莱生物科技有限公司）。
1.5辅料
硬脂酸镁（上海厚诚精细化工有限公司）、淀粉（上海厚诚精细化工有限公司）、碳酸氢钠（上海厚诚精细化工有限公司）。
2制备方法
2.1处方
硬脂酸镁、淀粉、碳酸氢钠等。
2.2制备
将原辅料研细，分别过120目筛备用。使用粘合剂制软材，过18目筛制湿粒，50℃干燥，整粒，加入硬脂酸镁压片。
3含量测定方法
3.1色谱条件分别考察0.05mol/L磷酸氢二钾（用20%磷酸调节pH至8.2）-乙腈50∶50），.05mol/L磷酸氢二钾（用20%磷酸调节pH至8.2）-乙腈（40∶60），0.05mol/L磷酸二氢钾一三乙胺一乙腈（70：0.1：30），0.2mol/L磷酸二氢铵溶液―甲醇（70：30）不同比例的流动相，结果以0.05mol/L磷酸氢二钾（用20%磷酸调节pH至8.2）-乙腈（40∶60）为流动相为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用0.05mol/L磷酸氢二钾（用20%磷酸调节pH至8.2）-乙腈（40∶60）为流动相为流动相。依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：0.05mol/L磷酸氢二钾（用20%磷酸调节pH至8.2）-乙腈（40∶60），检测波长：202nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按对依托红霉素峰计算应不得低于2000。
3.2对照品溶液的制备
精密称取对依托红霉素对照品适量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含80ug的溶液，即得。
3.3供试品溶液的制备
采用《中华人民共和国药典》（2015年版）溶出度测定法第二法进行检测，分别在5、15、25、35、45分钟时，取溶液5ml，滤过，取续滤液2ml，即得。
3.4专属性试验
依照处方取除对依托红霉素，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照3.3项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在对依托红霉素出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
3.5精密度试验
精密称取对依托红霉素对照品适量，加甲醇使溶解，制成浓度为80μg·mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.61%，表明本方法精密度良好。
3.6对照品的线性考察
精密稱取对依托红霉素对照品5mg，置25ml容量瓶中，加入甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取2、3、4、5、6、7、8mL，置于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照3.2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，对依托红霉素在40～160μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
3.7重现性试验
称取同一批的依托红霉素片样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.53%，结果表明此方法的重现性良好。
3.8准确度试验
精密称取已知含量的样品6份，分别加入一定量的对依托红霉素对照品，上述方法进行测定，计算回收率，平均回收率为99.6%，RSD=0.72%，结果表明样品加样回收率良好。
4溶出因素的考察
选择碳酸氢钠用量、淀粉用量、淀粉浆浓度为考察因素，采用正交试验法对影响溶出度的其它工艺条件进行优选。采用3个考察水平，用L9（34）正交表进行试验，因素水平表见表1。
5讨论
此测定方法可用于依托红霉素片中对依托红霉素溶出度的测定，本制剂稳定、可靠，碳酸氢钠用量为0.3公斤，淀粉用量12公斤，淀粉浆浓度为15%溶出度最好。.
参考文献：
[1]徐红，侯健.高效液相色谱的色谱柱的类型和流动相的选择方法[J].计量与测试技术.2010（02）
[2]崔丽君，徐广通，徐惠，许崇娟.反相高效液相色谱二元流动相组分的最佳化研究[J].山东建材学院学报.1993（03）
[3]王玉荣，李成，徐玉红，罗意文，张开礼，吴芳.HPLC测定复方依托红霉素洗剂中依托红霉素的含量[J].中国医药导报.2008（17）
[4]钟然，陈画虹.依托红霉素片含量测定方法的改进[J].中国药师.2001（01）
[5]徐红，侯健.高效液相色谱的色谱柱的类型和流动相的选择方法[J].计量与测试技术. 2010（02）
关键词：依托红霉素片；工艺；优化
依托红霉素中文别名红霉素丙酸脂十二烷基硫酸盐、红霉素硫酸月桂酸酯、无味红霉素干糖浆等。依托红霉素为红霉素丙酸酯的十二烷基硫酸盐，口服后在胃肠中分解为红霉素丙酯，部分在血液中水解成游离的红霉素。本实验研究依托红霉素片的制备方法并对其溶出因素进行考察。
1仪器与试药
1.1仪器：HLSH2—6型湿法混合制粒机（北京航空制造工程研究所）；78X-Z型片剂四用测定仪（上海黄海药检仪器厂）；HWP-5实验室蒸馏水器（郑州泽铭科技有限公司）；GFG80 120高效沸腾干燥机（广州兴荣机械有限公司）；FA1004A电子天平（成都市科恒达仪器设备有限责任公司）；双频数控加热超声波清洗器（上海汗诺仪器有限公司）；旋转式压片机（上海天祺制药机械有限公司）；LC-5520型高效液相色谱仪（陕西华信仪器设备有限公司）；US6180DH数显型超声波清洗器（北京优晟联合科技有限公司）。
1.2色谱柱：安捷伦 十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm）。
1.3对照品：对依托红霉素 购自中国药品生物制品检定所。
1.4试剂：磷酸二氢钾（上海江莱生物科技有限公司）、磷酸（上海江莱生物科技有限公司）、三乙胺（武汉强松精细化学品有限公司）、乙腈（上海江莱生物科技有限公司）、甲醇（上海江莱生物科技有限公司）。
1.5辅料
硬脂酸镁（上海厚诚精细化工有限公司）、淀粉（上海厚诚精细化工有限公司）、碳酸氢钠（上海厚诚精细化工有限公司）。
2制备方法
2.1处方
硬脂酸镁、淀粉、碳酸氢钠等。
2.2制备
将原辅料研细，分别过120目筛备用。使用粘合剂制软材，过18目筛制湿粒，50℃干燥，整粒，加入硬脂酸镁压片。
3含量测定方法
3.1色谱条件分别考察0.05mol/L磷酸氢二钾（用20%磷酸调节pH至8.2）-乙腈50∶50），.05mol/L磷酸氢二钾（用20%磷酸调节pH至8.2）-乙腈（40∶60），0.05mol/L磷酸二氢钾一三乙胺一乙腈（70：0.1：30），0.2mol/L磷酸二氢铵溶液―甲醇（70：30）不同比例的流动相，结果以0.05mol/L磷酸氢二钾（用20%磷酸调节pH至8.2）-乙腈（40∶60）为流动相为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用0.05mol/L磷酸氢二钾（用20%磷酸调节pH至8.2）-乙腈（40∶60）为流动相为流动相。依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：0.05mol/L磷酸氢二钾（用20%磷酸调节pH至8.2）-乙腈（40∶60），检测波长：202nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按对依托红霉素峰计算应不得低于2000。
3.2对照品溶液的制备
精密称取对依托红霉素对照品适量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含80ug的溶液，即得。
3.3供试品溶液的制备
采用《中华人民共和国药典》（2015年版）溶出度测定法第二法进行检测，分别在5、15、25、35、45分钟时，取溶液5ml，滤过，取续滤液2ml，即得。
3.4专属性试验
依照处方取除对依托红霉素，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照3.3项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在对依托红霉素出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
3.5精密度试验
精密称取对依托红霉素对照品适量，加甲醇使溶解，制成浓度为80μg·mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.61%，表明本方法精密度良好。
3.6对照品的线性考察
精密稱取对依托红霉素对照品5mg，置25ml容量瓶中，加入甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取2、3、4、5、6、7、8mL，置于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照3.2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，对依托红霉素在40～160μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
3.7重现性试验
称取同一批的依托红霉素片样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.53%，结果表明此方法的重现性良好。
3.8准确度试验
精密称取已知含量的样品6份，分别加入一定量的对依托红霉素对照品，上述方法进行测定，计算回收率，平均回收率为99.6%，RSD=0.72%，结果表明样品加样回收率良好。
4溶出因素的考察
选择碳酸氢钠用量、淀粉用量、淀粉浆浓度为考察因素，采用正交试验法对影响溶出度的其它工艺条件进行优选。采用3个考察水平，用L9（34）正交表进行试验，因素水平表见表1。
5讨论
此测定方法可用于依托红霉素片中对依托红霉素溶出度的测定，本制剂稳定、可靠，碳酸氢钠用量为0.3公斤，淀粉用量12公斤，淀粉浆浓度为15%溶出度最好。.
参考文献：
[1]徐红，侯健.高效液相色谱的色谱柱的类型和流动相的选择方法[J].计量与测试技术.2010（02）
[2]崔丽君，徐广通，徐惠，许崇娟.反相高效液相色谱二元流动相组分的最佳化研究[J].山东建材学院学报.1993（03）
[3]王玉荣，李成，徐玉红，罗意文，张开礼，吴芳.HPLC测定复方依托红霉素洗剂中依托红霉素的含量[J].中国医药导报.2008（17）
[4]钟然，陈画虹.依托红霉素片含量测定方法的改进[J].中国药师.2001（01）
[5]徐红，侯健.高效液相色谱的色谱柱的类型和流动相的选择方法[J].计量与测试技术. 2010（02）