含铁蛋白FAO1融合基因的衣藻核转化表达和分析

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【目的】fao1编码Candida cloacae中一种含铁辅基的长链脂肪醇氧化酶。通过构建该基因的衣藻核转化表达载体进行转化,根据表达蛋白的生物活性判断faol能否充分利用衣藻叶绿体中的铁元素行使功能;同时也为需铁固氮酶基因的研究提供方向。【方法】通过PCR把PsaD信号肽、fso1、His-tag标签融合,连接到pDBIe载体上;采用玻璃珠转化法,将重组子导入菜茵衣藻(CWl5)中;经博来霉素筛选后,获得转基因植株。运用PCR和RT—PCR法检测了转化衣藻,并且用亲和层析柱纯化蛋白,同时进行FA01活
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