目的 制备负载威灵仙总皂苷（clematis total saponins,CTS）丝素蛋白微载体，探讨其复合软骨细胞后促进兔膝关节软骨缺损修复的效果。方法 取5%丝素蛋白溶液与10 mg/mL CTS溶液、甘油混匀后，利用高压静电场结合冷冻干燥方法制备负载CTS丝素蛋白微载体，扫描电镜对样本表征并检测CTS累积释放量；同时制备丝素蛋白微载体。取6只4周龄新西兰大白兔膝关节软骨，分离培养软骨细胞并传代。取第3代细胞分别与两种微载体在微重力条件下共培养7d，期间倒置相差显微镜及扫描电镜观察软骨细胞在微载体上黏附情况，细胞计数试剂盒8（cell counting kit 8,CCK-8）检测细胞增殖活性，并与正常培养细胞比较。取30只3月龄新西兰大白兔制备双侧膝关节软骨缺损模型后随机分为3组（n=20）,A组膝关节软骨缺损不作任何处理，B、C组分别采用丝素蛋白微载体-软骨细胞复合物、负载CTS丝素蛋白微载体-软骨细胞复合物填充关节软骨缺损。术后12周取材，ELISA检测关节液基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9,MMP-9）、MMP-13、MMP组织抑制因子1（tissue inhibitor of MMP 1,TIMP-1）水平；大体观察及组织学观察（HE、甲苯胺蓝染色）评估软骨缺损修复情况；Western blot检测Ⅱ型胶原及蛋白聚糖表达；组织学及诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）免疫组织化学染色观察关节滑膜炎症程度。结果 负载CTS丝素蛋白微载体呈类球形，直径主要在300～500μm之间，表面呈多孔结构，孔隙率达35.63%±3.51%；药物缓释检测示微载体中CTS可长期缓慢释放。微重力条件下随培养时间延长，两种微载体表面黏附的软骨细胞逐渐增多，培养24 h时软骨细胞增殖活性均较正常培养细胞提高（P<0.05），两种微载体间差异无统计学意义（P>0.05）。动物体内实验观察，与A、B组相比，C组关节液中MMP-9、MMP-13含量均降低（P<0.05）,TIMP-1含量上调（P<0.05）。与A组相比，B、C组软骨缺损均有组织填充，且C组修复表面更完整，与周围软骨结合较好；组织学观察及Western blot检测显示B、C组国际软骨修复评分准则（ICRS）评分以及Ⅱ型胶原、蛋白聚糖相对表达量均优于A组，C组优于B组，差异均有统计学意义（P<0.05）。关节滑膜组织学观察显示，与A、B组相比，C组滑膜炎症细胞浸润及小血管增生减少，免疫组织化学染色示C组iNOS表达水平降低（P<0.05）。结论 负载CTS丝素蛋白微载体具有良好的CTS缓释效果及生物相容性，在微重力条件下能促进共培养的软骨细胞增殖，植入体内后能促进兔膝关节软骨缺损修复。