【摘 要】
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通过中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell, CHO)表达系统制备人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA),为HSA及其融合蛋白质药物的制备及功能研究提供依据。首先构建
【基金项目】
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中国科学院战略性先导科技专项(No.XDA01040200)
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通过中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell, CHO)表达系统制备人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA),为HSA及其融合蛋白质药物的制备及功能研究提供依据。首先构建含有目的基因的重组表达质粒pMH3-HSA,通过有限稀释法和Dot blot检测筛选阳性单克隆,随后扩大培养并悬浮驯化,然后运用5 L一次性生物反应器进行高密度放大培养,以无血清培养基B001和F001分别作为基础和流加培养基,以55 r/min、DO 20%~40%、pH 6.8~7.
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