【摘 要】
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为探讨快速高效表达山羊FSH(促卵泡素)基因的方法,将获得的FSHα,β亚基基因克隆到毕赤酵母快速表达载体pPICZαA中,然后将构建的载体线性化处理后,电击转化至毕赤酵母GS115中,
【机 构】
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浙江省台州医院生殖中心,扬州大学动物科学与技术学院
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为探讨快速高效表达山羊FSH(促卵泡素)基因的方法,将获得的FSHα,β亚基基因克隆到毕赤酵母快速表达载体pPICZαA中,然后将构建的载体线性化处理后,电击转化至毕赤酵母GS115中,经Zeocin抗生素筛选后获得阳性菌落,经甲醇诱导表达后进行SDS-PAGE和Western–blot分析。结果表明:pPICZαA载体可以快速正确的表达FSH,分子量为27KD,放射免疫法测定表达上清,表达量为20.155 mIU/mL,显著高于本实验室在细胞中的表达。
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