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摘 要:以桂醛、邻苯二甲酸二辛酯、二甲基萘3种化学挥发物作为信息素,对吉林省白山市抚松县露水河镇红松育苗林昆虫的趋避与吸引作用进行了实验研究。结果表明,粘板诱集到的昆虫有双翅目、膜翅目、鞘翅目、同翅目、鳞翅目、直翅目、长翅目几类。通过实验组与对照组之间的对比得知,这3种试剂皆能诱到双翅目、膜翅目和同翅目的昆虫,且数量较多;桂醛和邻苯二甲酸二辛酯还能诱到少量鞘翅目的昆虫。3种试剂对昆虫引诱作用最强的是邻苯二甲酸二辛酯,诱到昆虫数量最少的是二甲基萘。邻苯二甲酸二辛酯对鞘翅目昆虫作用不明显,二甲基萘对鞘翅目昆虫具有趋避作用,桂醛对鞘翅目昆虫具有一定的诱导作用。
关键词:EAG;信息素;吸引;趋避
中图分类号 Q96 文献标识码 A 文章编号 1007-7731(2015)03-04-29-04
Abstract:In this paper,cinnamaldehyde,dioctyl phthalate,dimethyl naphthalene three chemical volatiles as pheromones in Jilin Province Fusong Lushuihe town pine forest nursery aversion and attraction of insects have been explored. Experimental results show that the sticky board to trap insects Diptera,Hymenoptera,Coleoptera,Homoptera,Lepidoptera,Orthoptera,Mecoptera several categories. By comparison between the experimental group and the control group was informed that the three agents have encountered lured to Diptera,Hymenoptera and Homoptera insects,and a larger number;cinnamaldehyde and dioctyl phthalate also can induce a small amount Coleoptera insects. Three reagents insect attractant effect of the strongest phthalate,dioctyl phthalate,lured to a minimum number of insects is dimethyl naphthalene. Octyl phthalate coleopteran obvious,dimethylnaphthalene coleopteran have averse effects,cinnamaldehyde coleopteran induce a certain effect.
Key words:EAG;Pheromones;Attract;Aversion
1 引言
早在1832年人们就发现了昆虫雌雄之间存在性引诱现象。20世纪60年代以来,昆虫性信息素理论及应用技术均取得了巨大进展,许多人工合成信息化合物在害虫防治中得到了应用[1-3]。但这些研究的对象主要是鳞翅目昆虫,而对鞘翅目昆虫性信息素的研究则较少开展[4-5],1982年以前,共有9科21种鞘翅目昆虫性信息素的化学结构得到鉴定。昆虫性信息素,又称性外激素,是由同种昆虫的某一性别个体的特殊分泌器官分泌于体外,能被同种异性个体的感受器所接受,并引起异性个体产生一定的行为反应或生理效应(如觅偶、定向求偶、交配等)的微量化学物质[6-8]。昆虫性信息素分子从释放源到达接受者主要是通过介质空气或水传递的,其传递的方式主要有2种,一种是由于布朗运动而进行的扩散作用,另一种是由于介质流动而引起的传导作用。昆虫信息素的接收系统是昆虫的触角或感觉毛,通过周边神经系统将外界信息传递给中枢神经,从而作出相应的反应,使昆虫有效适应外部环境[9-10]。利用触角电位(EAG)和单细胞记录(SSR)等方法记录昆虫的电生理活动,极大地促进了昆虫性信息素的研究。昆虫性信息素是同种昆虫间异性相互联系进而交配的重要纽带和先决因素,严格保证了种群内昆虫在雌雄个体之间性的联系及物种有条不紊的繁衍。触角是昆虫感受性信息素的主要器官。性信息素发达的种类,其触角常具有显著的性二型现象,即接受者触角较释放者发达。触角电位(electroantennography,EAG)是直接检测昆虫对化学信号物质反应的电生理技术(Schneider,1957),能够快速检验触角对气味的反应活性和敏感性,在化学生态中也经常使用。由于该技术的高敏感性和高选择性,现已成为昆虫信息素及其他挥发性信息化合物生物测定的主要手段之一[11-13]。
2 材料与方法
2.1 EAG实验 触角电位仪由荷兰Syntech公司的智能化数据获取控制器IDAC-4、刺激气流控制器(Syntech CS-55)、微动操作仪(Syntech MN-151)、Syntech软件处理系统4部分组成。测定方法参照杜永均等、肖春、方宇凌等以及严福顺等[14]。刺激气流流速、持续气流均设定为400mL/min,刺激时间为15s,2次刺激间隔30~60s(依浓度而定以保证触角的活性完全恢复)。将剪成长15cm、宽2cm的定性滤纸纸条折成之字形作为各溶液的载体,测试剂量10L。用锋利的刀片将昆虫触角从基部切下,尖端切除少许后,用导电胶将其横搭在电极上,气味混合管与触角相距lcm。以液体石蜡为对照,测试不同化合物时,不同重复间样品刺激顺序不同。在测定昆虫对同种化合物、不同剂量的EAG反应时,不同剂量的刺激顺序按浓度由低到高进行。各种测定每根触角重复3次,共测试20根触角[15-17]。 2.2 野外试验 实验在吉林省白山市抚松县露水河镇红松育苗林进行。选取一列红松树,树下平放加药的粘虫板,每隔3棵树(约12m)下放一组粘虫板。按照3次重复依次放置(1-1,2-1,3-1,1-2...3-3),同时在各实验组旁边1m处放上相应空白对照(1-1-0,2-1-0,3-1-0,1-2-0...3-3-0)。为了减少环境不同引起的实验误差,每个重复的空白对照左右对调。用注射器将药品平均滴加在粘虫板上。2014年7月8日9:00第1次加药0.4mL;11:00第2次加药0.4mL;14:30第3次加药0.4mL;16:30第4次加药0.4mL。2014年7月9日9:00第5次加药0.2mL;11:00收取粘虫板并计算粘虫板上各类昆虫的数量。
3 结果
3.1 EAG实验结果 以EAG技术测定鞘翅目雌、雄成虫对α-藻烯、沉香醇、吲哚等12种挥发物(浓度均为10 000μL/L)的敏感度,结果见图1:
从实验结果来看,鞘翅目昆虫对桂醛、邻苯二甲酸二辛酯、二甲基萘3种挥发物的敏感度较高。这3种物质的EAG反应见图2:
3.2 野外实验结果 本实验以桂醛、邻苯二甲酸二辛脂、二甲基萘3种挥发物为诱导素,每种挥发物的实验组和对照组各3个。向粘板上分别滴加3种挥发物各0.4mL,将其粘于树下,每实验组与对照组算作一组,每组间相隔12m左右。每2h向实验组加等量的药品。本实验第一天早上9:00开始至第二天11:00结束。根据对粘板的观察与统计,实验结果见表1、表2、表3。
由图3-A可知,在以二甲基萘为诱导素的实验中,诱到的昆虫种类分别为双翅目、膜翅目、鞘翅目和同翅目。实验组中膜翅目数量较多,波动较大,对照组数量较少,波动较小;实验组中诱到少量同翅目;对照组中诱到少量鞘翅目。此现象说明二甲基萘对双翅目和膜翅目的作用并不明显,但对同翅目具有引诱作用,对鞘翅目具有趋避作用。
由图3-B可知,在以邻苯二甲酸二辛酯为诱导素的实验中,诱到的昆虫种类分别为双翅目、膜翅目、鞘翅目、同翅目、鳞翅目、直翅目和长翅目。其中实验组双翅目数量较对照组少,且数量波动较大;实验组中膜翅目数量较多,对照组较少;实验组和对照组中鞘翅目数量相同;实验组同翅目数量较对照组多;实验组中诱到少量鳞翅目;对照组中诱到少量长翅目和直翅目。据此分析,邻苯二甲酸二辛酯对膜翅目、同翅目和鳞翅目具有引诱作用,对双翅目、长翅目和直翅目具有趋避作用,对鞘翅目的作用不明显。
由图3-C可知,在以桂醛为诱导素的实验中,诱到的昆虫种类分别为双翅目、膜翅目、鞘翅目和同翅目。其中实验组双翅目数量多于对照组,且二者数量波动均较大;实验组中膜翅目数量较少,对照组较多;实验组和对照组中均诱到少量同翅目;实验组中诱到少量鞘翅目。由此可得,桂醛对双翅目和鞘翅目具有引诱作用,对膜翅目具有趋避作用,对同翅目的作用不明显。
不同的试剂对于昆虫的引诱能力不同:本次试验所诱到双翅目最多,其次是膜翅目,除此之外,还有鞘翅目、同翅目、鳞翅目、直翅目、长翅目的昆虫。通过对数据的统计可知,诱到昆虫种类多的是邻苯二甲酸二辛酯,诱到昆虫数目最多的也是邻苯二甲酸二辛酯。诱到昆虫种类最少的是二甲基萘和桂醛,诱到昆虫数量最少的是二甲基萘。
不同的试剂对于不同昆虫的引诱或趋避作用也不同:本实验重点研究的是3种诱导素对鞘翅目的诱导或趋避作用。实验中诱到鞘翅目最多的是以邻苯二甲酸二辛酯为诱导素的实验,但是实验组和对照组鞘翅目数量相同;二甲基萘的对照组和桂醛的实验组也诱到了少量的鞘翅目。由此可知,邻苯二甲酸二辛酯对鞘翅目作用不明显,二甲基萘对鞘翅目具有趋避作用,桂醛对鞘翅具有一定的诱导作用。除此之外,邻苯二甲酸二辛酯和二甲基萘对同翅目具有引诱作用,桂醛对其作用不明显。而3种诱导剂对膜翅目和双翅目的引诱或趋避作用又各不相同。
4 讨论
随着全社会对大量施用高毒性化学杀虫剂所引起的环境污染和害虫防治负面效应认识的不断深入,科学工作者迫切需要寻找一种保护环境的有效害虫防治方法。昆虫性信息素在害虫的综合治理方面具有极大的潜力,在应用方面取得了不少成功的经验。目前,昆虫性信息素主要用于害虫的预测、预报及防治上,同时也可采用昆虫性信息素与其他生物农药联用法进行害虫的防治和对害虫进行检疫。昆虫性信息素具有生物活性强和专一性高的显著特点,可灵敏地检测害虫的发生,它能诱集早期发生的或少量的害虫,尤其对偶发性害虫和目前尚无测报方法的害虫存在特殊价值,可以较准确地反映害虫消长规律,便于掌握防治时期,在我国一些地区的某些害虫测报中已被采用[18-20]。国外已鉴定了80余种可用于虫情测报及防治应用的昆虫性信息素,我国也已合成了40多种重要害虫的昆虫性信息素,并研制出一批适合于测报的诱捕器,我国对30种不同的害虫上进行了应用性信息素预测预报和防治技术研究[21-25]。昆虫性信息素作为一种灵敏可靠的监测工具,不仅可应用于害虫预测预报,也可以广泛应用到害虫检疫、疫区扩散范围监测中。性信息素可用于昆虫种类鉴定,区分个别在分类上容易混淆或近似的昆虫,并研究它们的地理分布。昆虫信息素具有专一性强、不杀害天敌、不污染环境和对生物无毒害等优势,对食品安全并有利于保护环境,受到国内外研究者的高度重视,在研发新型生物杀虫剂方面具有广阔的应用和发展前景。目前世界上已鉴定并合成了一批主要农林害虫的昆虫性信息素,有些已大面积推广应用在害虫测报和防治上,取得了突出的经济效益和社会效益[26-27]。昆虫信息素作为一种新型的环保防虫药物正逐步投入使用,但在评价、量化信息素监控和防治效果以及开发新型信息素等方面,还缺乏充分的参考数据。因此,要进一步加强有关昆虫行为,以及新型昆虫信息素的分离、鉴定、人工合成和昆虫种群密度变化等基础理论研究[28-30]。
参考文献
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(责编:张宏民)
关键词:EAG;信息素;吸引;趋避
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Abstract:In this paper,cinnamaldehyde,dioctyl phthalate,dimethyl naphthalene three chemical volatiles as pheromones in Jilin Province Fusong Lushuihe town pine forest nursery aversion and attraction of insects have been explored. Experimental results show that the sticky board to trap insects Diptera,Hymenoptera,Coleoptera,Homoptera,Lepidoptera,Orthoptera,Mecoptera several categories. By comparison between the experimental group and the control group was informed that the three agents have encountered lured to Diptera,Hymenoptera and Homoptera insects,and a larger number;cinnamaldehyde and dioctyl phthalate also can induce a small amount Coleoptera insects. Three reagents insect attractant effect of the strongest phthalate,dioctyl phthalate,lured to a minimum number of insects is dimethyl naphthalene. Octyl phthalate coleopteran obvious,dimethylnaphthalene coleopteran have averse effects,cinnamaldehyde coleopteran induce a certain effect.
Key words:EAG;Pheromones;Attract;Aversion
1 引言
早在1832年人们就发现了昆虫雌雄之间存在性引诱现象。20世纪60年代以来,昆虫性信息素理论及应用技术均取得了巨大进展,许多人工合成信息化合物在害虫防治中得到了应用[1-3]。但这些研究的对象主要是鳞翅目昆虫,而对鞘翅目昆虫性信息素的研究则较少开展[4-5],1982年以前,共有9科21种鞘翅目昆虫性信息素的化学结构得到鉴定。昆虫性信息素,又称性外激素,是由同种昆虫的某一性别个体的特殊分泌器官分泌于体外,能被同种异性个体的感受器所接受,并引起异性个体产生一定的行为反应或生理效应(如觅偶、定向求偶、交配等)的微量化学物质[6-8]。昆虫性信息素分子从释放源到达接受者主要是通过介质空气或水传递的,其传递的方式主要有2种,一种是由于布朗运动而进行的扩散作用,另一种是由于介质流动而引起的传导作用。昆虫信息素的接收系统是昆虫的触角或感觉毛,通过周边神经系统将外界信息传递给中枢神经,从而作出相应的反应,使昆虫有效适应外部环境[9-10]。利用触角电位(EAG)和单细胞记录(SSR)等方法记录昆虫的电生理活动,极大地促进了昆虫性信息素的研究。昆虫性信息素是同种昆虫间异性相互联系进而交配的重要纽带和先决因素,严格保证了种群内昆虫在雌雄个体之间性的联系及物种有条不紊的繁衍。触角是昆虫感受性信息素的主要器官。性信息素发达的种类,其触角常具有显著的性二型现象,即接受者触角较释放者发达。触角电位(electroantennography,EAG)是直接检测昆虫对化学信号物质反应的电生理技术(Schneider,1957),能够快速检验触角对气味的反应活性和敏感性,在化学生态中也经常使用。由于该技术的高敏感性和高选择性,现已成为昆虫信息素及其他挥发性信息化合物生物测定的主要手段之一[11-13]。
2 材料与方法
2.1 EAG实验 触角电位仪由荷兰Syntech公司的智能化数据获取控制器IDAC-4、刺激气流控制器(Syntech CS-55)、微动操作仪(Syntech MN-151)、Syntech软件处理系统4部分组成。测定方法参照杜永均等、肖春、方宇凌等以及严福顺等[14]。刺激气流流速、持续气流均设定为400mL/min,刺激时间为15s,2次刺激间隔30~60s(依浓度而定以保证触角的活性完全恢复)。将剪成长15cm、宽2cm的定性滤纸纸条折成之字形作为各溶液的载体,测试剂量10L。用锋利的刀片将昆虫触角从基部切下,尖端切除少许后,用导电胶将其横搭在电极上,气味混合管与触角相距lcm。以液体石蜡为对照,测试不同化合物时,不同重复间样品刺激顺序不同。在测定昆虫对同种化合物、不同剂量的EAG反应时,不同剂量的刺激顺序按浓度由低到高进行。各种测定每根触角重复3次,共测试20根触角[15-17]。 2.2 野外试验 实验在吉林省白山市抚松县露水河镇红松育苗林进行。选取一列红松树,树下平放加药的粘虫板,每隔3棵树(约12m)下放一组粘虫板。按照3次重复依次放置(1-1,2-1,3-1,1-2...3-3),同时在各实验组旁边1m处放上相应空白对照(1-1-0,2-1-0,3-1-0,1-2-0...3-3-0)。为了减少环境不同引起的实验误差,每个重复的空白对照左右对调。用注射器将药品平均滴加在粘虫板上。2014年7月8日9:00第1次加药0.4mL;11:00第2次加药0.4mL;14:30第3次加药0.4mL;16:30第4次加药0.4mL。2014年7月9日9:00第5次加药0.2mL;11:00收取粘虫板并计算粘虫板上各类昆虫的数量。
3 结果
3.1 EAG实验结果 以EAG技术测定鞘翅目雌、雄成虫对α-藻烯、沉香醇、吲哚等12种挥发物(浓度均为10 000μL/L)的敏感度,结果见图1:
从实验结果来看,鞘翅目昆虫对桂醛、邻苯二甲酸二辛酯、二甲基萘3种挥发物的敏感度较高。这3种物质的EAG反应见图2:
3.2 野外实验结果 本实验以桂醛、邻苯二甲酸二辛脂、二甲基萘3种挥发物为诱导素,每种挥发物的实验组和对照组各3个。向粘板上分别滴加3种挥发物各0.4mL,将其粘于树下,每实验组与对照组算作一组,每组间相隔12m左右。每2h向实验组加等量的药品。本实验第一天早上9:00开始至第二天11:00结束。根据对粘板的观察与统计,实验结果见表1、表2、表3。
由图3-A可知,在以二甲基萘为诱导素的实验中,诱到的昆虫种类分别为双翅目、膜翅目、鞘翅目和同翅目。实验组中膜翅目数量较多,波动较大,对照组数量较少,波动较小;实验组中诱到少量同翅目;对照组中诱到少量鞘翅目。此现象说明二甲基萘对双翅目和膜翅目的作用并不明显,但对同翅目具有引诱作用,对鞘翅目具有趋避作用。
由图3-B可知,在以邻苯二甲酸二辛酯为诱导素的实验中,诱到的昆虫种类分别为双翅目、膜翅目、鞘翅目、同翅目、鳞翅目、直翅目和长翅目。其中实验组双翅目数量较对照组少,且数量波动较大;实验组中膜翅目数量较多,对照组较少;实验组和对照组中鞘翅目数量相同;实验组同翅目数量较对照组多;实验组中诱到少量鳞翅目;对照组中诱到少量长翅目和直翅目。据此分析,邻苯二甲酸二辛酯对膜翅目、同翅目和鳞翅目具有引诱作用,对双翅目、长翅目和直翅目具有趋避作用,对鞘翅目的作用不明显。
由图3-C可知,在以桂醛为诱导素的实验中,诱到的昆虫种类分别为双翅目、膜翅目、鞘翅目和同翅目。其中实验组双翅目数量多于对照组,且二者数量波动均较大;实验组中膜翅目数量较少,对照组较多;实验组和对照组中均诱到少量同翅目;实验组中诱到少量鞘翅目。由此可得,桂醛对双翅目和鞘翅目具有引诱作用,对膜翅目具有趋避作用,对同翅目的作用不明显。
不同的试剂对于昆虫的引诱能力不同:本次试验所诱到双翅目最多,其次是膜翅目,除此之外,还有鞘翅目、同翅目、鳞翅目、直翅目、长翅目的昆虫。通过对数据的统计可知,诱到昆虫种类多的是邻苯二甲酸二辛酯,诱到昆虫数目最多的也是邻苯二甲酸二辛酯。诱到昆虫种类最少的是二甲基萘和桂醛,诱到昆虫数量最少的是二甲基萘。
不同的试剂对于不同昆虫的引诱或趋避作用也不同:本实验重点研究的是3种诱导素对鞘翅目的诱导或趋避作用。实验中诱到鞘翅目最多的是以邻苯二甲酸二辛酯为诱导素的实验,但是实验组和对照组鞘翅目数量相同;二甲基萘的对照组和桂醛的实验组也诱到了少量的鞘翅目。由此可知,邻苯二甲酸二辛酯对鞘翅目作用不明显,二甲基萘对鞘翅目具有趋避作用,桂醛对鞘翅具有一定的诱导作用。除此之外,邻苯二甲酸二辛酯和二甲基萘对同翅目具有引诱作用,桂醛对其作用不明显。而3种诱导剂对膜翅目和双翅目的引诱或趋避作用又各不相同。
4 讨论
随着全社会对大量施用高毒性化学杀虫剂所引起的环境污染和害虫防治负面效应认识的不断深入,科学工作者迫切需要寻找一种保护环境的有效害虫防治方法。昆虫性信息素在害虫的综合治理方面具有极大的潜力,在应用方面取得了不少成功的经验。目前,昆虫性信息素主要用于害虫的预测、预报及防治上,同时也可采用昆虫性信息素与其他生物农药联用法进行害虫的防治和对害虫进行检疫。昆虫性信息素具有生物活性强和专一性高的显著特点,可灵敏地检测害虫的发生,它能诱集早期发生的或少量的害虫,尤其对偶发性害虫和目前尚无测报方法的害虫存在特殊价值,可以较准确地反映害虫消长规律,便于掌握防治时期,在我国一些地区的某些害虫测报中已被采用[18-20]。国外已鉴定了80余种可用于虫情测报及防治应用的昆虫性信息素,我国也已合成了40多种重要害虫的昆虫性信息素,并研制出一批适合于测报的诱捕器,我国对30种不同的害虫上进行了应用性信息素预测预报和防治技术研究[21-25]。昆虫性信息素作为一种灵敏可靠的监测工具,不仅可应用于害虫预测预报,也可以广泛应用到害虫检疫、疫区扩散范围监测中。性信息素可用于昆虫种类鉴定,区分个别在分类上容易混淆或近似的昆虫,并研究它们的地理分布。昆虫信息素具有专一性强、不杀害天敌、不污染环境和对生物无毒害等优势,对食品安全并有利于保护环境,受到国内外研究者的高度重视,在研发新型生物杀虫剂方面具有广阔的应用和发展前景。目前世界上已鉴定并合成了一批主要农林害虫的昆虫性信息素,有些已大面积推广应用在害虫测报和防治上,取得了突出的经济效益和社会效益[26-27]。昆虫信息素作为一种新型的环保防虫药物正逐步投入使用,但在评价、量化信息素监控和防治效果以及开发新型信息素等方面,还缺乏充分的参考数据。因此,要进一步加强有关昆虫行为,以及新型昆虫信息素的分离、鉴定、人工合成和昆虫种群密度变化等基础理论研究[28-30]。
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(责编:张宏民)