细菌内同源重组构建人p21^WAF1基因重组腺病毒

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目的 构建人p21^WAF1基因重组腺病毒载体,并在293细胞中包装制备重组腺病毒。方法 将人p21^WAF1基因亚克隆连接到腺病毒转移质粒pshuttle-cmv,得到阳性重组转移质粒psh-p21。先将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1转化BJ5183菌,筛选得到AdBJ5183菌,再将Pme Ⅰ线性化的psh-p21转化AdBJ5183菌,经细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒pAdp21。经PacⅠ和BstXⅠ酶切及PCR鉴定,将正确的重组腺病毒质粒pAdp21转染293细胞包装病毒。用RT-PCR和
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