人乳头瘤病毒11型L1基因原核表达系统的构建及鉴定

来源 :中华地方病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lkjall
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)L1原核表达系统pBAD(B)-HPV11L1,表达HPVL1蛋白,为进一步制备基因工程疫苗奠定基础.方法PCR法从尖锐湿疣组织标本中扩增人乳头瘤病毒11型L1基因片段,克隆至pBluescript质粒,并测序.将其从克隆重组质粒中切下连入表达载体,建立pBAD(B)-HPV11L1原核表达重组质粒,在大肠杆菌宿主菌Top10中,经阿拉伯糖诱导,表达融合蛋白L1,经SDS-PAGE电泳和Western blot进行鉴定.结果3株HPV11L1经测序发现变异一致,每株均有2个核苷酸变异,但未影响氨基酸变化.经SDS-PAGE鉴定L1蛋白相对分子质量为59×103,与预期值相同,Western blot证明表达蛋白能与单克隆抗体反应,成功构建了pBAD(B)-HPV11L1原核表达系统.结论所构建的pBAD(B)-HPV11L1原核表达系统能够高效表达HPV11L1蛋白。

其他文献
目的 探讨国人肾移植后骁悉(MMF)、环孢素A(CsA)和泼尼松(Pred)联合应用的最适剂量.方法比较常规剂量组(104例)和低剂量组(96例)患者肾移植术后免疫抑制剂用量和急性排斥反应、肺部感染发生率和人/移植肾生存率.结果MMF和CsA用量在术后3个月、Pred用量在术后6个月内常规剂量组明显高于低剂量组.常规剂量组在6个月内包括活检证实、临床推断和亚临床排斥,其总的急性排斥发生率为17.3
目的 探索下唇缺损修复的新方法.方法对下唇肿瘤切除后缺损超过全长2/3以上的患者,设计下唇矩形口轮匝肌肌黏膜瓣推进转移修复肿瘤切除后缺损.结果2000年1月以来我们对6例下唇肿瘤患者进行治疗,随访6个月~3年,无肿瘤复发,下唇形态及闭合功能良好.结论本手术方法设计合理,操作简单,术后形态功能良好,是下唇缺损修复的良好方法之一。
目的 探讨完全腹腔镜下肝脏左外叶解剖性切除手术的方法和适应证. 方法在不阻断全肝血流的情况下,应用多种器械于完全腹腔镜下进行解剖性肝左外叶切除7例(男3例,女 4例),其中原发性肝癌2例,肝脏血管瘤5例(2例为多发).术前3例行超声和CT检查,4例行超声、CT和MRI检查. 结果 7例手术均在完全腹腔镜下顺利完成,平均手术时间210 min,平均出血量700 ml,平均输血量343 ml.术后平均
目的 探讨使用乳晕真皮内注射蓝色染料法前哨淋巴结活检在早期乳腺癌治疗中的作用和价值. 方法回顾性分析25例早期乳腺癌患者应用乳晕真皮内注射蓝色染料法前哨淋巴结活检的临床结果.结果 25例患者中成功检测出前哨淋巴结者24例,检出率为96.0%.共检出前哨淋巴结62枚,平均每例2.5枚.病理结果中HE染色5例淋巴结有转移,免疫组化染色7例阳性.本组前哨淋巴结检出的灵敏度为87.5%;准确性96.0%;