探讨吴茱萸碱对骨肉瘤MG-63细胞增殖与凋亡的影响及其机制。
方法吴茱萸碱作用于骨肉瘤MG-63细胞24 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测吴茱萸碱对MG-63细胞的增殖抑制作用。流式细胞术检测吴茱萸碱对细胞周期、细胞凋亡及细胞内钙离子浓度的影响。利用BALB/C小鼠建立骨肉瘤移植瘤模型,观察吴茱萸碱对骨肉瘤模型的生长影响。用Western blotting检测吴茱萸碱对Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达的影响。
结果随着吴茱萸碱浓度(0.25 μmol/L、0.5 μmol/L、1.0 μmol/L、2.0 μmol/L和4.0 μmol/L)增加,MG-63细胞抑制率也明显增加[(4.18±1.26)%、(15.49±2.26)%、(40.55±6.57)%、(49.87±7.69)%和(60.42±8.29)%],2.0 μmol/L组与对照组(0)比较差异有统计学意义(t=-2.66,P<0.05)。2.0 μmol/L吴茱萸碱作用MG-63细胞24 h后凋亡率为(64.67±8.63)%、S期细胞比例为(85.33±9.31)%、钙离子荧光值为97.33±21.31,对照组凋亡率为(4.94±0.81)%、S期细胞比例为(43.67±8.92)%、钙离子荧光值为28.67±8.92,差异均有统计学意义(t=-11.90,P<0.05;t=-7.22,P<0.05;t=-6.65,P<0.05)。小鼠模型吴茱萸碱组肿瘤重量为(2.15±0.35)g,对照组肿瘤重量为(4.29±0.49)g,差异有统计学意义(t=7.95,P<0.05)。与对照组(1.00±0.00)比较,吴茱萸碱可降低β-catenin蛋白表达(0.72±0.36),升高Bax(1.15±0.27)、Caspase-3(1.46±0.18)蛋白表达,差异均有统计学意义(t=-3.05,P<0.05;t=-6.42,P<0.05;t=-5.85,P<0.05)。
结论吴茱萸碱可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖并诱导其凋亡。