基于p38 MAPK/NF-κB信号通路探讨中华雪胆醇提物对盐酸/乙醇诱导的大鼠急性胃溃疡保护作用

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tp20201892
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目的:探讨中华雪胆醇提物(HC-EE)对盐酸/乙醇(HCl/EtOH)诱导的大鼠急性胃溃疡保护作用及机制。方法:采用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞体外评价HC-EE对炎症介质生成的抑制作用;采用HCl/EtOH溶液(以60%乙醇为溶剂,HCl浓度为150 mmol·L-1)诱导大鼠急性胃溃疡模型体内评价HC-EE对急性胃溃疡的保护作用,40只雄性SD大鼠随机平均分为5组,即正常组、模型组、HC-EE低剂量(30 mg·kg-1,HC-EE 30)组、HC-EE高剂量(60 mg·kg-1,HC-EE 60)组及雷尼替丁(35 mg·kg-1)组,各组连续灌胃给药3 d,每天2次,末次给药30 min后模型组及各给药组给予HCl/EtOH溶液诱导大鼠急性胃溃疡。对各组动物进行麻醉,分离胃组织,采用电子成像技术记录大鼠胃内壁溃疡面,Image J 1.8.0软件计算药物的溃疡抑制率,采用苏木素-伊红(HE)和高碘酸-希夫(PAS)染色法观察大鼠病理组织学改变,Griess法测定细胞培养液中的一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定大鼠血清(或细胞培养液)中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6、血管细胞粘附分子1(VCAM-1)、前列腺素E2(PGE2)的水平,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组胃组织磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)/p38 MAPK、p-核转录因子-κB(NF-κB)p65/NF-κB p65蛋白表达水平。结果:体外实验显示,HC-EE能显著下调模型细胞NF-κB信号介导的炎症介质NO及TNF-α、IL-1β、IL-6、VCAM-1的表达(P<0.05,P<0.01)。体内实验结果显示,与正常组比较,模型组大鼠胃组织损伤明显,溃疡面积显著增大,TNF-α、IL-6的水平显著升高(P<0.01),PGE2的含量显著降低(P<0.01),p38 MAPK、NF-κB p65的磷酸化水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,HC-EE呈剂量依赖性地改善HCl/EtOH诱导的胃组织损伤和炎细胞浸润,提高溃疡抑制率,显著减少TNF-α、IL-6的释放量(P<0.01),HC-EE 60组增加PGE2的含量(P<0.05),HC-EE 60组可显著抑制胃组织蛋白p38 MAPK、NF-κB p65的磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。结论:HC-EE可改善HCl/EtOH诱导的大鼠急性胃溃疡,其作用机制可能与抑制p38 MAPK/NF-κB信号介导的炎症介质表达有关。
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