11种兰属植物DNA的提取及RAPD-PCR实验体系的建立与优化

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采用改进的CTAB-DNA提取方法,从11种兰属植物的嫩叶中提取总DNA。所得的DNA样品的A260/A280值在1.7~1.9之间,琼脂糖凝胶上主带清晰,较少降解,样品纯度高,DNA量大。另外,对影响RAPD-PCR的Mg^2+、dNTPs、Taq酶、引物浓度等因素进行了优化。确定优化的反应体系为:75ng模板DNA,1×Buffer,2.5mmol/LMg^2+,0.15mmol/LdNTPs,0.75UTaq酶,引物浓度0.4μmol/L,反应总体积为25山。该体系在20个供试兰属实验材料
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