不同方法在不同程度色素覆盖的黑色素瘤辅助诊断运用中的对比观察

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目的

探讨不同黑色素处理方法在不同程度黑色素含量黑色素瘤辅助诊断中的应用价值,以提高HE和免疫组织化学(IHC)染色质量,保证诊断的准确性。

方法

运用脱黑色素法和异色染色法(AEC显色法和Giemsa双染法)对15例黑色素瘤组织(中少量黑色素组织10例,多量黑色素组织5例)进行黑色素处理,然后进行HE和IHC染色,对比观察,筛选出最佳黑色素处理方法。IHC抗体为鉴别诊断中常用的Melan A、HMB45。

结果

(1)HE:0.25%高锰酸钾氧化20 min脱黑色素HE染色评分高,与0.1%、0.5%高锰酸钾组差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)IHC:对照组:黑色素未处理,呈棕黑色与DAB棕黄色难以区分。脱黑色素法:高锰酸钾法、改良高锰酸钾法和H2O2法,黑色素去除基本干净,但由于强氧化作用抗原丢失致染色减弱,部分存在脱片现象。异色染色法:Giemsa双染法将黑色素染成墨绿色,与肿瘤细胞对比明显,便于区分。AEC显色法肿瘤细胞呈红色可与黑色素区分,但染片不能长期保存。Melan A、HMB45在高锰酸钾法、改良高锰酸钾法、H2O2法、AEC显色法、Giemsa双染法和对照组评分差异显著,具有统计学意义(P<0.05)。两两比较后发现,Giemsa双染法、AEC显色法和改良高锰酸钾法评分高于高锰酸钾法和对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。在中少量黑色素组织中,Melan A、HMB45在Giemsa双染法中评分显著高于改良高锰酸钾法,差异均具有统计学意义(P<0.05)。但在多量黑色素组织中,改良高锰酸钾法评分高于Giemsa双染法,HMB45评分差异具有统计学意义(P<0.05)。

结论

Giemsa双染法,染色清晰,对比明显,优于其他黑色素处理方法。但在不同黑色素含量组织中,Giemsa双染法适合于中少量黑色素病例;而在多量黑色素组织中,因黑色素与肿瘤细胞互相叠加区域多,不易分辨,推荐改良高锰酸钾法。

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