目的建立一种体外分离、纯化、培养和扩增子宫内膜间充质干细胞(MSCs)的方法,并对培养的子宫内膜MSCs进行鉴定。方法采用机械和胶原酶消化相结合的方法分离、纯化子宫内膜间质细胞,再利用克隆纯化法分离子宫内膜MSCs。对得到的子宫内膜MSCs进行传代培养和扩增。流式细胞术检测细胞表面抗原CD90、CD105、CD146、CD34和CD45的表达。将第3代子宫内膜MSCs冻存1个月后再复苏,鉴定复苏后细胞的免疫表型。结果子宫内膜间质细胞可形成克隆,从大克隆可分离出MSCs。流式细胞术检测得到的子宫内膜MSCs表达MSCs的标志物CD90、CD105和CD146,不表达造血干细胞的表面标志物CD34和CD45。冻存再复苏后的细胞活力达95%以上,细胞免疫表型与冻存前相似。结论该方法可以较好地分离子宫内膜MSCs,是一种实用、可靠、高效的分离方法。