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目的调查新生儿重症监护病房（NICU）医护人员手卫生依从性,找出薄弱环节。方法采用前瞻性观察研究,选取2017年1至3月在山东大学第二医院在NICU工作的医护人员,随机调取各个时段、各个病室监控视频。应用NICU监控视频观察医护人员手卫生执行情况,统计并分析医护人员手卫生依从性及其影响因素。结果不同工作年限医护人员间手卫生依从性差异存在统计学意义（χ2=6.566,P〈0.05）。夜班与白班医护人员手卫生依从性差异存在统计学意义（χ2=5.641,P〈0.05）。应用辅助通气患儿的医护人员手卫生依从性高于