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目的建立红车轴草中大豆苷元、染料木素、芒柄花黄素含量的测定方法。方法采用乙醚提取、纯化红车轴草酸水解产物,然后用RP-HPLC法同时测定3种异黄酮含量。结果大豆苷元、染料木素、芒柄花黄素的线性范围均为0.5～100.0μg/mL,平均回收率分别为95.70%、93.82%和83.36%。结论该方法基质简单、测定简便、快速、稳定性好。