【摘 要】
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目的 利用逆转录病毒载体PLXSN介导iNOS基因转染,为逆转录病毒介导的iNOS转基因防治血管移植术后再狭窄的研究奠定实验基础。方法 采用QIAGEN plasmid Maxi Kit纯化PLXSN-iNOS
【机 构】
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福建省立医院心外科,福建医科大学生物化学与分子生物学系,广东外语外贸大学门诊部
【基金项目】
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福建省自然科学基金资助项目(C0310023);福建省科技厅重点课题资助项目(2004Y017);福建省卫生厅青年基金资助项目(2004-1-15)
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目的 利用逆转录病毒载体PLXSN介导iNOS基因转染,为逆转录病毒介导的iNOS转基因防治血管移植术后再狭窄的研究奠定实验基础。方法 采用QIAGEN plasmid Maxi Kit纯化PLXSN-iNOS;通过脂质体介导的DNA转染法将PI。XSN—iNOS导入包装细胞PA317中;经G418筛选获得抗性克隆,命名为PA317/iNOS;提取抗性克隆细胞基因组DNA,用PCR进行鉴定;用NIH3T3细胞测定病毒上清滴度。结果 PA317/iNOS细胞能稳定合成和分泌重组逆转录病毒颗粒,并在约142b
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