【摘 要】
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目的 探讨HBV S、C双靶区反义锁核酸(LNA)的抗病毒疗效.方法 设计合成互补于HBV S、C基因翻译起始区的反义LNA与脂质体混合,经尾静脉注入小鼠体内,用时间分辨免疫荧光分析法
【机 构】
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广州医学院生物化学与分子生物学教研室
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目的 探讨HBV S、C双靶区反义锁核酸(LNA)的抗病毒疗效.方法 设计合成互补于HBV S、C基因翻译起始区的反义LNA与脂质体混合,经尾静脉注入小鼠体内,用时间分辨免疫荧光分析法定量检测小鼠血清HBsAg;荧光PCR定量检测血清HBV DNA含量;RT-PCR检测肝组织HBV C-mRNA的表达;免疫组化法检测肝细胞HBsAg、HBcAg的表达;自动生化分析仪检测血清白蛋白(Alb)、ALT、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)等指标;小鼠肝脏、肾脏进行常规病理切片并HE染色,观察反义LNA对小鼠脏器的影响.结果 血清HBsAg的表达,注射后第1、3、5天,单靶区S组的抑制率分别为23.3%、37.9%和48.7%;单靶区C组分别为21.2%、32.6%和40.7%;双靶区SC组分别为30.6%、61.2%和72.8%.血清HBV DNA,注射后第1天开始下降,双靶区SC组的DNA下降最明显,其第1、3、5天分别下降了18.5%、36.1%和52.9%.5 d后,单靶区S组、单靶区C组和双靶区SC组小鼠肝细胞HBsAg、HBcAg的表达显著低于对照组.小鼠肝肾功能及组织学未见异常.结论 HBV S、C双靶区反义LNA对HBV转基因鼠抗病毒有显著作用,且抑制作用优于单靶区反义LNA.
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