【摘 要】
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用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ分别对雅致枝霉As3.2806基因组DNA进行消化,而后在低浓度条件下利用T4DNA连接酶使DNA自身环化.根据已知基因序列,设计一对长度为35nt的长反向引物和两
【机 构】
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南开大学微生物系、天津市微生物功能基因组学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.30200176)和天津市自然科学基金资助项目(No.013802511).
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用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ分别对雅致枝霉As3.2806基因组DNA进行消化,而后在低浓度条件下利用T4DNA连接酶使DNA自身环化.根据已知基因序列,设计一对长度为35nt的长反向引物和两对较短的引物,以基因组连接产物为模板,通过三轮嵌套式PCR反应,获得一长度约为4kb的扩增片段.经序列测定表明得到了Δ^6-脂肪酸脱氢酶基因上游序列约为1.3kb,初步序列分析显示该序列为一潜在的启动子序列.
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