狂犬病病毒核蛋白基因在大肠杆菌中稳定表达条件的优化及纯化

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将狂犬病病毒SRV9株核蛋白基因按正确的读码框克隆至GST融合表达载体pGEX-4T-1中,转化至大肠杆菌Rosetta株,IPTG诱导表达。表达的融合蛋白经SDS—PAGE分析显示,相对分子量约为82kD,与预期大小一致。Western-blot检测结果表明,融合蛋白能与多克隆阳性血清发生特异性反应。为获取大量ELISA包被用核蛋白,试验还借助SDS—PAGE方法对重组目的基因的表达条件进行了优化,比较了诱导温度、菌密度、IPTG浓度、诱导时间等参数对重组基因表达的影响,以确定最佳诱导表达条件。结果表明
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