【摘 要】
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目的应用免疫磁珠分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法分选人食管鳞癌细胞(esophagealsquamous carcinoma cell,ESCC)中的神经生长因子受体(nerve growth factor r
【机 构】
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福建医科大学省立临床医学院,福建省立医院胸外科,第二军医大学附属长海医院心胸外科,南京军区福州总医院心胸外科
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目的应用免疫磁珠分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法分选人食管鳞癌细胞(esophagealsquamous carcinoma cell,ESCC)中的神经生长因子受体(nerve growth factor receptor,NGFR)阳性细胞,并对其肿瘤干细胞样特征进行研究。方法采用MACS分选人ESCC中的NGFR阳性细胞。通过流式细胞仪法测定分选细胞的纯度及细胞周期分布,并计算细胞回收率;MTT法测定细胞数,绘制生长曲线并计算细胞群体倍增时间;平板克隆实验测定平板克隆形成率;裸鼠接种成瘤实验测定体内致瘤性,从而鉴定NGFR阳性ESCC的干细胞特性。结果 NGFR阳性细胞约占肿瘤细胞的1.89%,经过磁珠分选后纯度显著提高,达89.94%,细胞回收率为19.83%。与未分选细胞相比,分选后NGFR阳性细胞的增殖速度明显提高,生长曲线左移,细胞倍增时间缩短[(25.22±8.15)hvs.(47.41±12.69)h,P=0.01],平板克隆形成率显著增加[(16.27±8.31)%vs.(1.22±0.35)%,P=0.00],处于活跃增殖期S、G2、M期的细胞显著增加(72.7%vs.18.8%);裸鼠皮下接种的转移瘤形成率增加(8/10vs.1/10),转移瘤重量显著增加[(0.72±0.53)gvs.(0.16±0.26)g,P=0.00]。结论应用MACS技术能有效分选出人ESCC中的NGFR阳性细胞,其具有肿瘤干细胞特性。
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