抗菌肽Magainin基因的克隆及其在Pichia pastoris中的表达

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：a57556836

【摘要】

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用化学合成法合成了以酵母偏爱密码子编码的抗菌肽magainin基因片段,合成片段拼接后,与pUC19重组,获得magainin基因.Magainin基因与酵母表达载体pPIC3重组,构建胞内表达载体p

【作者】

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陈海旭邹冠玉屈贤铭杨胜利

【机构】

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中国科学院上海生物工程研究中心

【出处】

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中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2002年4期

【关键词】

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抗菌肽 Magainin基因克隆酶母表达 pPIC3 antibacterial peptide expression in Pichia pastori

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划(863计划)

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用化学合成法合成了以酵母偏爱密码子编码的抗菌肽magainin基因片段,合成片段拼接后,与pUC19重组,获得magainin基因.Magainin基因与酵母表达载体pPIC3重组,构建胞内表达载体pPIC3-Mag,电击法转化GS115宿主菌,经表型筛选和PCR鉴定证实了目的基因已稳定整合入Pichia pastoris酵母基因组中.阳性克隆用甲醇诱导表达,用免疫印迹法确定了产物的正确性.利用琼脂孔穴扩散法和液相测定法证明了重组magainin具有抗菌活性.

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