【摘 要】
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对肾型鸡传染性支气管炎病毒分离株Ck/Jiangsu/DS10/2008株(DS10株)膜蛋白(M)基因进行扩增、克隆和序列测定,并与GenBank中的其它25株参考株的M基因进行比对分析并构建进化树
【机 构】
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江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心
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对肾型鸡传染性支气管炎病毒分离株Ck/Jiangsu/DS10/2008株(DS10株)膜蛋白(M)基因进行扩增、克隆和序列测定,并与GenBank中的其它25株参考株的M基因进行比对分析并构建进化树,研究其遗传进化关系.另将M基因克隆至杆状病毒表达系统pFastBac1载体并转染Sf9昆虫细胞进行表达,经间接免疫荧光鉴定,用琼扩试验验证表达产物的反应性,以研究M基因表达产物的生物学活性.测序结果表明DS10的M基因全长为678bp,编码225个氨基酸.遗传进化分析表明,DS10病毒与其它不同致病型的传染性支气管炎病毒共属同一大分支.间接免疫荧光检测表明,M蛋白在Sf9细胞中得到表达,琼扩试验验证表达产物具有良好的反应性,以上结果表明所表达的M蛋白具有良好的生物学活性.本研究表达的M蛋白可为其生物学活性研究及其诊断抗原、新型疫苗开发提供基础材料.
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