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以RT-PCR方法扩增出犬冠状病毒(CCv)YS1、CI1 2株国内分离病毒的部分纤突蛋白基因,经酶切鉴定为CCV特异性核苷酸片段.采用平端连接法将WizardTM PCR纯化试剂盒纯化的PCR产物克隆于pUC19Sma Ⅰ酶切位点上,获得YS1pUC19、CI1pUC19重组质粒.琼脂糖凝胶电泳鉴定表明:重组质粒大于蓝斑菌质粒.以Bam H Ⅰ、KpnⅠ双酶切重组质粒可获得比原PCR产物略大的核苷酸片段,并从中以PCR方法扩增出与原PCR产物大小相同的核苷酸片段.