目的:研究胡黄连苦苷Ⅱ（picrosideⅡ）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡中微小RNA-1（microRNA-1,miR-1）及下游靶基因抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）表达的影响,探讨胡黄连苦苷Ⅱ的心肌保护作用及其机制。方法:将H9c2心肌细胞随机分为正常组,模型组(H₂O₂ 200μmol·L^-1),胡黄连苦苷Ⅱ(50,100,200μmol·L^-1)+H₂O₂(200μmol·L^-1)组,胡黄连苦苷Ⅱ 200μmol·L^-1组。胡黄连苦苷Ⅱ与心肌细胞孵育6 h后,加入H₂O₂继续培养2 h。药物处理结束后,噻唑蓝（3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT）法检测细胞存活率、比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase,LDH）活性、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚（4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI）染色和细胞凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3）性检测评估细胞凋亡、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR）检测细胞中Caspase-3,Bcl-2,miR-1的m RNA表达、蛋白质免疫印迹（Western blot）技术检测细胞抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达。结果:与正常组相比,H₂O₂能显著降低细胞生存率,增加细胞凋亡率,且Caspase-3活性和m RNA表达均增加（P<0.01）,同时伴有miR-1表达水平的上调及其下游靶基因抗凋亡因子Bcl-2表达的下调（P<0.01）。与模型组比较,胡黄连苦苷Ⅱ预处理可显著升高细胞存活率,降低LDH活性,降低细胞凋亡率,显著降低Caspase-3活性和m RNA表达（P<0.05,P<0.01）,并使Bcl-2 mRNA表达升高（P<0.05,P<0.01）,western blot结果表明,胡黄连苦苷Ⅱ能显著上调miR-1表达水平及下调其下游靶基因抗凋亡因子Bcl-2表达（P<0.05,P<0.01）。结论:胡黄连苦苷Ⅱ对H₂O₂诱导的H9c2心肌细胞凋亡具有保护作用,其机制与下调miR-1的表达进而上调其靶基因Bcl-2的表达有关。