【摘 要】
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目的 建立一种检测登革病毒（dengue virus, DENV）特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法 利用毕赤酵母系统表达4个血清型登革病毒包膜蛋白Ⅲ区（envelope protein domainⅢ, EDⅢ）,并采用改良过碘酸钠法对EDⅢ蛋白标记辣根过氧化物酶（Horseradish peroxidase, HRP）,建立一种可同时检测4个血清型登革病毒EDⅢ蛋白特异性抗体的双抗原夹
【基金项目】
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">广东省自然科学基金项目（No.2020A1515011171）；
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目的 建立一种检测登革病毒（dengue virus, DENV）特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法 利用毕赤酵母系统表达4个血清型登革病毒包膜蛋白Ⅲ区（envelope protein domainⅢ, EDⅢ）,并采用改良过碘酸钠法对EDⅢ蛋白标记辣根过氧化物酶（Horseradish peroxidase, HRP）,建立一种可同时检测4个血清型登革病毒EDⅢ蛋白特异性抗体的双抗原夹心ELISA法。并对2014年广州珠江医院门诊和住院确诊的登革热患者血清标本进行检测，并与澳洲Panbio MAC ELISA检测的敏感性进行比较。结果 本研究成功建立了一种检测4个血清型登革病毒EDⅢ蛋白特异性抗体的双抗原夹心ELISA法，该方法能同时检测到4个血清型登革病毒EDⅢ蛋白免疫的小鼠血清和Ⅰ型登革病毒EDⅢ蛋白免疫的兔血清，而与烟曲霉AF-MP蛋白免疫的小鼠血清和兔血清均无交叉反应。对184份健康人血清标本检测全为阴性，而对168份确诊为登革病毒感染患者血清标本检测结果表明，两种诊断方法检测结果差异无统计学意义，P<0.001（57.1%vs 57.7%）,联合NS1抗原检测方法，其敏感性提高到97.6%。结论 双抗原夹心ELISA法检测登革病毒EDⅢ特异性抗体具有高度的特异性，但如果能同时联合抗原检测可明显提高登革热的早期诊断率。
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