【摘 要】
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为了研究脂多糖与β葡聚糖对重组亚单位疫苗的协同免疫促进效果,本研究重组表达了迟钝爱德华氏菌的一个高效亚单位疫苗候选蛋白甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH),利用纯化的重组GA
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为了研究脂多糖与β葡聚糖对重组亚单位疫苗的协同免疫促进效果,本研究重组表达了迟钝爱德华氏菌的一个高效亚单位疫苗候选蛋白甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH),利用纯化的重组GAPDH(rGAPDH)蛋白单独或混合脂多糖和β葡聚糖免疫牙鲆,免疫后通过检测牙鲆抗体水平、免疫相关基因表达及免疫保护力三方面指标变化对脂多糖和酵母β葡聚糖的免疫促进效果进行研究。ELISA结果显示:脂多糖和β葡聚糖与rGAPDH共免疫组牙鲆的抗体效价在免疫后第14和30天均显著高于单独免疫rGAPDH的牙鲆,第30天时其效价为211.76;荧光定量PCR结果显示:相比PBS对照组,牙鲆在注射免疫后脾脏组织中IL-1β、IL-6、MHC-IIα、IgM、TCRα及C型溶菌酶6种免疫相关基因表达量均出现不同程度的上调,而其中共免疫组牙鲆基因表达水平显著高于单独免疫rGAPDH的牙鲆;免疫保护性实验显示:共免疫组牙鲆在攻毒后累计死亡率显著低于对照组和单独免疫rGAPDH蛋白组,直至第14天累计死亡率为30%,相对免疫保护率为68%。研究表明:脂多糖和β葡聚糖作为疫苗免疫刺激剂使用可显著增强牙鲆的免疫应答水平,提升亚单位疫苗的免疫效果。
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