重组VEGF165基因表达与活性检测

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目的为血管内皮生长因子(VEGF165)生物学分子机制的研究奠定基础。方法用RT-PCR法从人胎肝总RNA中逆转录扩增VEGF165,将其插入表达载体pET-32a(+)Vector中,将测序鉴定正确的重组表达载体转化至E.ColiXL-Blue中表达,并用纯化蛋白刺激人脐静脉内皮细胞,检测其促增殖活性。结果经异丙基硫代.βD-半乳糖苷(WTG)诱导后,VEGF地(His)6得到有效表达,Westernb10t分析可以观察到相对分子质量为26kD的诱导表达条带,该表达蛋白可与VEGF多克隆抗体发生特异性反
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