实验用五指山小型猪胚胎生殖细胞的分离培养

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目的 对从猪的原始生殖细胞分离获得胚胎干细胞的方法进行初步研究.方法 胎儿取自怀孕26~28 d的实验用五指山母猪.分离胎儿生殖嵴获得PGCs,接种于STO饲养层上,以DMEM+2 mmol/L谷氨酰胺+0.1 mmol/L非必需氨基酸+0.1 mmol/L β-巯基乙醇+100 IU/mL青霉素+100 pg/mL链霉素+15%FCS作为培养基,对细胞进行培养传代.结果 培养的细胞传至4~5代,形态多样,经AKP染色、SSEA-1免疫荧光染色、Oct-4免疫荧光标记等方法鉴定为阳性,具有胚胎干细胞的特征.
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