基于表面增强拉曼光谱法快速检测细菌抗生素敏感性的研究

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jimzhan
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目的基于核酸适配体表面增强拉曼光谱技术(SERS),建立一种快速检测细菌抗生素敏感性试验方法,评价不同抗生素对细菌拉曼光谱强度的影响。方法将大肠埃希菌O157:H7和金黄色葡萄球菌分别与不同抗生素作用,再将大肠埃希菌O157:H7和金黄色葡萄球分别与其特异性适配体共孵育,通过表面增强银纳米粒子的方法在金黄色葡萄球菌-适配体和大肠埃希菌-适配体表面还原银纳米粒子,通过SERS技术检测目标细菌。结果分别用大肠埃希菌O157:H7和金黄色葡萄球菌进行SERS试验,用不同浓度萘啶酸、硫酸粘菌素、土霉素、利福平作用于大肠埃希菌。结果表明在抗生素作用1h发现萘啶酸浓度达到1μg/ml、硫酸粘菌素浓度达到1μg/ml、土霉素浓度达到1μg/ml、利福平浓度为2μg/ml时,细菌拉曼光谱显著降低,并可快速确定此时抗生素浓度为大肠埃希菌最低抑制浓度(MIC)值;用不同浓度环丙沙星、氯霉素、红霉素、万古霉素作用于金黄色葡萄球菌,结果在抗生素作用1h发现环丙沙星浓度为1μg/ml、氯霉素浓度达到1μg/ml、红霉素浓度达到1μg/ml、万古霉素浓度达到1μg/ml,细菌拉曼光谱显著降低,并可快速确定此时抗生素浓度为金黄色葡萄球菌最低抑制浓度(MIC)值;当反应时间达到2h,可发现抗生素低于MIC时,细菌的拉曼强度与对照组相似,而MIC未发生变化,证明试验结果正确。结论基于核酸适配体SERS方法可快速评价抗生素对细菌的影响,并在短时间内确定MIC值,因此可用于检测细菌对抗生素敏感性的快速检测。
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