【摘 要】
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为获得副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白中的穿孔素前体蛋白P2 (OmpP2)基因的表达产物,利用特异性引物以HPS血清13型江西分离株扩增ompP2基因,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测
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为获得副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白中的穿孔素前体蛋白P2 (OmpP2)基因的表达产物,利用特异性引物以HPS血清13型江西分离株扩增ompP2基因,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测定和分析.结果表明:ompP2全基因含一个1 092 bp的开放阅读框,编码一个含363个氨基酸的蛋白,与所报道的HPS ompP2基因(登录号:HM172029.1)的同源性为100％.再将其亚克隆于原核表达载体pET-32a(+)中构建重组表达质粒pET-32a(+)-ompP2.后转化至受体菌大肠杆菌BL21(DE3),进行IPTG诱导.经SDS-PAGE检测,表达的重组蛋白分子质量与预期的58 ku一致.Westem blot分析表明,表达产物与HPS阳性血清能发生反应,显示表达产物具有良好的反应活性.
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