噬菌体展示技术构建寻常型天疱疮患者桥粒芯糖蛋白3抗体文库

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目的用噬菌体展示技术构建寻常型天疱疮患者桥粒芯糖蛋白3抗体文库。方法收集寻常型天疱疮患者外周血,分离淋巴细胞抽提RNA,采用RT-PCR反应以人的抗体特异性HuVHBACK、HuJHFOR和HuVkBACK、HuJKFOR引物扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片段,并将其与接头拼接成ScFv片段克隆于大肠杆菌。结果抗体基因ScFv片段与噬菌体基因Ⅲ的产物以融合蛋白的形式在噬菌体表面表达,构建了天疱疮患者的重组噬菌体抗体库,ELISA检测证明ScFv基因产物具有抗体活性。结论天疱疮噬菌体抗体库的构建为天疱疮发病机理、诊断和治疗研究打下了基础。
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