【摘 要】
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MCF2L基因突变在骨关节炎的发生与发展过程中扮演重要作用,本研究使用ENSEMBL及COMSIC数据库筛选MCF2L突变位点,构建质粒及腺病毒载体;将小鼠原代滑膜成纤维细胞分为正常对照
【基金项目】
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泉州市科技项目(非扩髓带锁髓内钉在胫骨开放性骨折的临床应用,No.201101SH01)资助
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MCF2L基因突变在骨关节炎的发生与发展过程中扮演重要作用,本研究使用ENSEMBL及COMSIC数据库筛选MCF2L突变位点,构建质粒及腺病毒载体;将小鼠原代滑膜成纤维细胞分为正常对照组,野生型重组腺病毒干预的MCF2L过表达组和突变型重组腺病毒的突变组,检测细胞上清中IL-lβ、MMP-13、PGE2水平及细胞凋亡。通过数据库检测分析发现可将第11位精氨酸作为突变位点;p Yr-ads-4-MCF2L重组质粒及突变型和野生型重组腺病毒包装成功;突变组MCF2L RNA表达是对照组的1.92倍,过表达组是对照组的1.85倍;突变组及过表达组MCF2L蛋白表达水平均显著高于对照组;过表达组上清中PGE2、MMP-13、IL-lβ水平显著低于对照组(p<0.05),突变组上清中PGE2、MMP-13、IL-lβ水平显著高于对照组(p<0.05),且突变组上清中PGE2、MMP-13、IL-lβ水平明显高于过表达组,且差异存在统计学意义(p<0.05);对照组及过表达组细胞凋亡不明显,在1%至10%之间;突变组细胞凋亡率高于对照组及过表达组,凋亡率达60%。滑膜成纤维细胞使用MCF2L基因突变重组腺病毒感染后,PGE2、MMP-13、IL-lβ水平均明显提高,细胞凋亡率明显加大。本研究对MCF2L的单核苷酸多态性对滑膜成纤维细胞的炎症因子及凋亡活性的影响进行分析,探讨骨性关节炎发病过程中MCF2L发挥的作用,探讨MCF2L基因与骨关炎的关系,为临床应用提供依据。
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