应用体外重组PCR技术构建鸡单链抗体基因的研究

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tangguorong
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用异硫氰酸胍与β-巯基乙醇联合变性的方法,从罗曼鸡脾脏中提取总RNA, RNA样品经紫外检测后,A230=0.0715,A260=0.1518,A280=0.0793;根据莱航鸡免疫球蛋白的轻、重链可变区基因的骨架区1和骨架区4的序列,分别设计一对引物,通过反转录-PCR方法,分别扩增出了罗曼鸡的轻、重链可变区基因,1.5 %的琼脂糖凝胶电泳图谱显示其大小分别约为360 bp和420 bp;以VL和VH为模板,借助重组PCR手段,构建了VL-Linker-VH形式的鸡单链抗体,1.5 %的琼脂糖凝胶电泳图
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